A1 - Trasformazione batterica, purificazione della Green Fluorescent Protein (GFP)
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La trasformazione batterica è una tecnica di biologia molecolare messa a punto per facilitare l'introduzione di plasmidi nei batteri al fine di ottenere l’espressione di proteine di interesse. Il plasmide utilizzato per la trasformazione (pGLO) contiene il gene che codifica per la GFP, isolato dalla medusa tropicale Aequorea victoria. I batteri sottoposti a trasformazione vengono fatti crescere su terreni selettivi con conseguente formazione di colonie che, se esposte a radiazioni UV, emettono una fluorescenza verde, prova dell'avvenuta espressione fenotipica della GFP.
Gli studenti, inoltre, purificano la proteina GFP mediante cromatografia ad interazione idrofobica. Il risultato dell'esperimento viene verificato mediante l'osservazione con una lampada UV delle varie frazioni raccolte durante l’eluizione dalla colonna cromatografica.
Parole chiave: #plasmidi, #cromatografia, #proteine.
Nota:
Possibilità di svolgere il laboratorio solamente presso Opificio Golinelli.
Fondazione Golinelli e G-LAB rispettano tutti i protocolli ministeriali e regionali al fine di garantire una fruizione in presenza nel pieno rispetto delle attuali norme governative per la tutela della salute pubblica.
Classe IV Secondaria II grado
Classe V Secondaria II grado
Via Paolo Nanni Costa, 14
40133
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